Extracción de ADN plasmídico-Alto rendimiento, económico
Procedimiento de extracción de ADN plasmídico de alto rendimiento y económico, basado en un método mejorado de lisis alcalina. Este protocolo puede producir 43 microgramos de ADN de alta calidad a partir de 1.7 mL de cultivo bacteriano. Además es más rápido y cuesta solo 5 centavos. No requiere kits caros, lo que es perfecto para laboratorios con poco presupuesto. Puedes descargar el protocolo para imprimir en este link: patharkar.com/2019/03/plasmid...
Пікірлер: 23
Hola! Fue un éxito el montaje de l extracción de plasmideos. Infinitas gracias por este protocolo que por cierto es rápido, económico y muy fácil de realizar. 👌👏
@RahulPatharkar
3 жыл бұрын
De nada.
Hola, gracias por el vídeo, podrías decir que contienen las soluciones 1 y 2 que mencionas?
@RahulPatharkar
4 жыл бұрын
Hola Paula, la descripción de las soluciones las encuentras en nuestra página web. Aquí te dejo el link del protocolo con la receta de las soluciones . Gracias por ver nuestro video. rahulpatharkar.000webhostapp.com/wp-content/uploads/2019/03/MiniPrep-Simple.pdf
¿una vez extraído el adn se puede conservar en alguna solución acuosa ? ¿cual y cuanto tiempo se conservaría sin desaparecer?
@RahulPatharkar
4 жыл бұрын
Disuelve el pelet de ADN con 2-10mM Tris HCl pH 8.5. Para preservar el ADN por muchos años consérvalo a -20oC.
Hola esperaba ver una concentración final de 43Ug no 0,5 ug ? saludos
@RahulPatharkar
3 жыл бұрын
La cantidad de ADN plasmidico que obtengas va a depender en el numbero de copias del plasmido que usas. y de tu habilidad tecnica.
Buenas tardes, excelente video. Mañana realizaré este protocolo, porque tuve problemas con el anterior. Creo este si va a funcionar. Cuando ustedes dicen altas revoluciones son cuantas 13mil, 14mil? y a que temperatura? 4 grados esta bien ? Otra pregunta: las soluciones I, II y III, cuanto tiempo duran, después de preparadas? Quedo muy agradecida por este video por que se ve más sencillo y mucho mejor. Les contaré como me va
@RahulPatharkar
3 жыл бұрын
Por favor chequea el protocolo dándole click en el link localizado en la descripción. El protocolo te da detalles de revoluciones en la centrifugadora. Las soluciones 1 y 3 son estables. La solución 2 dura máximo un año. Cuéntanos que tal te va con la extracción.
@erikaalexandradazacardona4878
3 жыл бұрын
@@RahulPatharkar muchas gracias. Hoy lo voy a realizar. Es de gran ayuda los videos que publican. Ayer ya ví el otro video y ya tengo los datos de la centrifugación. Esperemos me de bien. El protocolo que use antes (otro, que de hecho es más largo)... Me generó dudas y problemas porque casi no dio para cuantificar DNA y en el paso donde coloco la solución II el precipitado nunca quedó abajo sino por el contrario quedo una capa arriba y creo eso afecto mi resultado. Puede deberse al reactivo como tal? Infinitas gracias de una Colombiana desde Brasil. 😀🇨🇴
Donde está el vídeo más largo?
@RahulPatharkar
4 жыл бұрын
Acá está el link para la versión larga del video, pero solo está en inglés. kzread.info/dash/bejne/m4xsycSOpqi0g6Q.html
En que se basa para decir que cuesta sólo 5 centavos. Acaso no toman en cuenta el Valor y Depreciación de los Equipos? El Tiempo de elaboración? El Laboratorista? Así sea extraído en una Universidad tiene que tener un precio justo que tome en cuenta todos esos factores.
@RahulPatharkar
4 жыл бұрын
Gracias por tu opinión. Estamos comparando el precio de los reactivos que utilizamos versus el kit comercial por miniprep que cuesta alrededor de 1 dólar.
Cuál o como sería la conclusión?
@catherineespinoza5917
3 жыл бұрын
La conclusion es que puedes obtener DNA plasmidico de buena calidad de una manera bien economica.
@RahulPatharkar
3 жыл бұрын
High quality plasmid can be made very cheaply.
Se puede usar ese ADN para clonar?
@RahulPatharkar
2 жыл бұрын
sí
@iricori3275
2 жыл бұрын
@@RahulPatharkar se puede extraer el ADN de una tela seca, dónde cayó saliva?
La bata y los guantes donde quedarón!!!!
@RahulPatharkar
3 жыл бұрын
Usa la bata y los guantes si piensas que estos quimicos son peligrosos para ti y/o piensas que no eres lo suficientemente cuidadoso cuando sigas este procedimiento.