La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en una técnica que ha ayudado tanto a la investigación, como al diagnóstico de enfermedades, puesto que permite amplificar secuencias de interés a partir de una diversidad de muestras, para después detectarlas por algún método apropiado y concluir la presencia o ausencia del agente, gen o mutación que se busca.
Los componentes que se utilizan en la reacción son: Material genético previamente extraído, primers o cebadores, nucleótidos (dNTPs), polimerasa termoestable (Taq polimerasa), buffer con cloruro de magnesio y opcionalmente DMSO, todo esto en una mezcla maestra o master mix.
La reacción consiste en, una vez juntos todos los componentes, existan cambios controlados de temperatura para poder, en principio, desnaturalizar la doble cadena de DNA en cadenas sencillas para que, posteriormente y a una temperatura diferente, se logre la alineación o alineamiento de los primers a su secuencia blanco, los cuales flanquean la región de interés para que, finalizando el ciclo, la taq polimerasa sintetice las hebras complementarias y todo se vuelva a repetir dependiendo del protocolo establecido para cada reacción.
Después de haberse efectuado cierta cantidad de ciclos, tendremos una amplificación exponencial de las secuencias de interés, las cuales podrán ser detectadas ya sea por métodos manuales (electroforesis en gel de agarosa) o automatizados (PCR en tiempo real).
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