Salting out and Dialysis methods

Ғылым және технология

단백질을 crude sample 등에서 추출하는 salting out 기법 및 dialysis 수행 방법입니다
If you want to watch the English version of the video, go to the address below.
• Salting out and Dialysis

Пікірлер: 48

  • @tariqsaleh6032
    @tariqsaleh60324 жыл бұрын

    Thank you! This was the only useful video I could find about dialysis

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    4 жыл бұрын

    Thank you so much for your comment. If you have any question, feel free to let us know. I wish you have a great research results.

  • @eunjuok5466
    @eunjuok54664 жыл бұрын

    Love it, very easy to understand yet very informative. Can you do a rt-qpcr video??

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    4 жыл бұрын

    Thank you for watching our video. The RT-qPCR video you mentioned is linked below. Please let me know if you have any additional questions. I wish you all the best in your research. RNA isolation by TRIzol kzread.info/dash/bejne/npNplNmRh7aZoLA.html Real-time PCR kzread.info/dash/bejne/pJOKlautlprQgto.html

  • @jintube5179
    @jintube517911 ай бұрын

    영상 감사드립니다. 질문이 있는데, Membrane tube 를 회전 시키지 않고 고정하는 이유는 무엇인지 알수 있을까요?

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    11 ай бұрын

    안녕하세요, 질문 감사드립니다. Dialysis 할때 membrane내에 용액을 절반정도 채우고 나머지 50%의 부분이 팽창하며 버퍼 교환이 발생해야 하는데, 이때 membrane이 회전을 하게 되면 꼬이면서 비어있는 부분이 팽창하지 못합니다. 그리고 심한경우 membrane이 찢어지는 일도 간혹 발생할 수 있습니다. 결국 dialysis 효율이 감소되고 심한경우 membrane 손상이 발생할 수 있어 회전을 시키지 않도록 고정시키는 것입니다. 수행하시는 연구 모두 좋은 성과 거두시기를 기원 드립니다. ^^

  • @seolhoshin1177
    @seolhoshin11772 жыл бұрын

    안녕하세요. 이번에 salting out에 대한 레포트를 작성하고 있는 대학생 입니다. 동영상 덕분에 더욱 이해가 잘 되었습니다 감사합니다. 혹시 실례가 안된다면 레포트 작성에 참고 할수 있을까해서 댓글 남겨봅니다.

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    2 жыл бұрын

    영상 시청해주셔서 감사합니다 도움이 되셨다니 저희도 기쁩니다 레포트 작성에 영상 활용 하셔도 되세요~^^ KZread 규정상 영상 편집 재배포 등은 아마 안 될 겁니다 올라간 영상 그대로 링크를 잘 활용 하셔도 될 듯 하구요 감사합니다 ^^

  • @narumonmahaamnad8661
    @narumonmahaamnad86614 жыл бұрын

    Excuse me, i want to advice from you about method dialysis in procedure. If i want to desalting by dialysis. How to prepare dialysis buffer ? In your clip that are buffer or buffer So i'm confuse because i'm not good for understand in your language. thank a millions for answer

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    4 жыл бұрын

    Thank you for watching our video. In general, various types of dialysis buffers are available depending on the purpose. If you want to measure the enzyme activity by purifying protein, you can add Glycerol, KCl, EDTA, Dithiothreitol, etc. based on Tris-buffer. In addition, PBS buffer is prepared and used as a dialysis buffer when measuring simple protein content. The above image was made for the purpose of showing the basic method of dialysis and used PBS buffer. If you have any additional questions, please feel free to ask us. I hope your research goes well. Thank you.

  • @user-kn9zw3wq1h
    @user-kn9zw3wq1h5 ай бұрын

    안녕하세요 혹시 2:47 에서 sample buffer 와 dialysis buffer 는 다른 버퍼를 써야하는 이유가 있나요? 실험 설계중인데 같은 버퍼를 사용한 논문들이 종종 있어서요..

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    5 ай бұрын

    안녕하세요, 영상 시청해주셔서 감사합니다. 연구자 마다 의견이 상이할 수 있으나, sample buffer와 dialysis buffer를 다르게 사용할 경우 buffer간 이온의 농도차이가 발생하여 dialysis 효율이 좋아지는 경우가 있습니다. 저희 실험실은 이러한 의견들을 참조하고 경험을 기반으로 이와같은 방법을 주로 사용하고 있습니다. 서로 다른 버퍼가 아닌 동일 버퍼를 사용하는 실험실도 많으므로, 저희 방법을 "여러 가지 종류 중 한가지 실험방법"으로 봐주시면 좋겠습니다. 수행하시는 연구에서 모두 좋은 결과 얻으시기를 기원드립니다. 감사합니다.

  • @user-kn9zw3wq1h

    @user-kn9zw3wq1h

    5 ай бұрын

    @@CDRTtube 헉 친절한 답변 감사합니다 추운 겨울 감기 조심하세요!

  • @player_matdori
    @player_matdoriАй бұрын

    안녕하세요! Ammonium sulfate 침전으로 salting out 실험을 진행하려하는 학생입니다 실험 영상 잘 보았고 도움이 많이 되었습니다 궁금한게 한가지 있는데 ammonium sulfate solution을 넣기 전에 sample에 따로 전처리과정을 진행하셨는지 궁금합니다!

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    Ай бұрын

    안녕하세요, 실험 수행하는 연구자 마다 각자의 경험에 따라 방법을 조금씩 다양하게 바꿔 진행하는 것이 일반적입니다. 침전용 salt를 넣기전 원하는 size가 아닌 단백질을 필터 등으로 걸러내거나 gradient centrifugation 등으로 먼저 걸러내는 방법도 있습니다. 물론 순서를 바꿔서 salting out을 한다음 그런 처리를 하는 경우도 있구요. 저희는 ammonium sulfate 처리시 별도의 전처리 없이 진행하고 이후 단계에서 고도화 된 정제 방법을 사용하고 있습니다. 실험 목적에 따라 방법의 변화를 고민하시면 될 것 같습니다. 좋은 결과 얻으시기를 기원 드립니다.

  • @sh7arwt3teer99
    @sh7arwt3teer992 жыл бұрын

    please if you can explain to me, why the mobile phases containing a concentration of ammonium sulfate promote the binding of many proteins to HIC columns??

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    2 жыл бұрын

    Thanks for the question. HIC takes advantage of differences in the hydrophobicity of proteins to separate proteins. Proteins precipitated with ammonium sulfate, a solution with high ionic strength, are attached to the hydrophobic surface of the resin in the column as soon as they are injected into the column. And then, if the conditions are changed, the protein comes out of the column due to the difference in hydrophobicity strength. Currently, three theories have been proposed for the separation of substances by hydrophobicity through HIC. Van der Waals forces theory, salting out theory, thermodynamic theory. If you have any additional questions, feel free to ask. I wish you always in good health.

  • @Leen-ih8ql

    @Leen-ih8ql

    2 жыл бұрын

    @@CDRTtube Thank you so much

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    2 жыл бұрын

    @@Leen-ih8ql It's my pleasure. thank you.

  • @user-ct5sb5ko9w
    @user-ct5sb5ko9w5 ай бұрын

    안녕하세요. 해당 영상정보 정말 유익합니다! 궁금한게 좀 있어요! 왜 tris buffer 랑 PBS buffer를 따로 사용하셨는지? 두번째로는 트리스는 1몰 기준으로 제조된건가요? 답변부탁드릴게요! 감사합니다

  • @user-ct5sb5ko9w

    @user-ct5sb5ko9w

    5 ай бұрын

    tris 는 1M pH 7.2 기준으로 만들어진건가요?

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    5 ай бұрын

    @@user-ct5sb5ko9w안녕하세요, 시청해 주셔서 감사드립니다. 실험 기법은 각 연구자 마다 경험 및 결과 만족도에 의해 다양하게 달라질 수 있습니다. 저희 영상의 내용도 그와 동일하다고 이해해 주시면 좋겠습니다. 보통 dialysis할때 동일 buffer를 사용하여 salt 제거를 하는 방법도 있으나, 단백질 추출시 사용한 buffer와 dialysis할때 사용하는 buffer를 서로 다르게 만들어 사용하는 방법이 있습니다. 동일 buffer를 사용하면 salting out 등을 통해 확보된 단백질에서 salt가 제거되는데, buffer를 서로 다르게 사용하면 salt를 포함한 buffer조성물이 같이 이동하며 salt를 더 빠르고 깔끔하게 제거할 수 있다는 이론도 있습니다. 저희 실험실은 그 경험이 있기 때문에 이렇게 방법을 정해서 사용하고 있습니다. 그렇지만 kinase 등의 연구 등 phosphate의 변화가 있으면 좋지 않은 경우 등, 실험 목적에 따라 동일 buffer를 사용하거나, lysosome 단백질 연구 등을 위해 pH를 낮춰 dialysis buffer를 제조하는 등 변화를 주는 방법도 사용하고 있습니다. 두가 질문에 답이 되었다면 좋겠습니다. 추가 궁금사항이 있으시면 언제라도 질문 주시면 감사하겠습니다. 수행하시는 연구 모두에서 최고의 성과 거두시기를 기원드립니다. ^^

  • @user-ct5sb5ko9w

    @user-ct5sb5ko9w

    5 ай бұрын

    정말 상세한 답변 감사합니다. 제가 단백질 추출을하고 salting out 으로 정제하는 연구를 진행하고 있습니다. 해당 영상으로 어떻게 마무리를 해야하는지 알겠어요! 제가 PBS buffer pH를 7.4 로 제조는 했는데 tris puffer제조를 어떻게 해야할지 고민중이라.. 동일하게 pH 을 만들어야할까요? 조언 부탁드리겠습니다!

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    5 ай бұрын

    @@user-ct5sb5ko9w 안녕하세요 pH변화는 단백질의 net charge를 변화 시킬수 있으므로 세포내 소기관 중 pH가 상이한 곳의 단백질 연구를 위해서는 해당 pH를 선택하시는 것이 좋지만, 그렇지 않은 일반적 단백질의 경우 가장 보편적인 pH를 선택하시는 것이 좋겠지요. pH7.4로 PBS를 사용하신다면 그리고 일반적인 세포내 pH조건의 단백질 연구를 하신다면 Tris buffer 역시 pH를 7.4로 사용하시는 것이 좋다고 생각합니다. 하나하나 연구가 진행되면서 즐거운 결과들이 나오고, 그것을 기반으로 훌륭한 연구자가 되실 것이라 생각합니다. 좋은 결과 많이 도출되시기를 기원드립니다.

  • @nabiilahariij7634
    @nabiilahariij76344 жыл бұрын

    Can u add subtitles in english? :"

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    4 жыл бұрын

    Thanks for watching our video. later on I will try to put some English caption.

  • @irocktheworld000

    @irocktheworld000

    3 жыл бұрын

    Which subtitle is this?

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    3 жыл бұрын

    @@irocktheworld000 Thank you for your comment, This is Korean. Hope your research will going perfect.

  • @lay9083
    @lay90834 жыл бұрын

    감사합니다. 혹시.. 염석효과라는 slating out이 무엇인지 알수 있을까요?

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    4 жыл бұрын

    CDRT-tube영상을 시청하여 주셔서 감사합니다. Salting out(염석)은 물 또는 기타 용매에 녹아 있는 물질을 분리하는 방법을 지칭합니다. 용매와 반응하여 고르게 녹아있는 물질(용질)은 그 표면에 용매와 친한 성질이 있어서 용매 사이사이에 잘 분포하게 됩니다. 그러나 염(salt)를 투입할 경우 salt가 용매와 물질의 친화력을 방해하여 물질이 용매사이에 고르게 분포하지 못하게 되고, 결국 그 물질간에 결합을 하게 되어 사이즈가 커지면서 용매로 부터 분리됩니다. 이러한 반응을 일반적으로 염석이라고 지칭합니다. 혹시라도 궁금하신 점이 추가로 있으시면 언제든 질문 올려 주세요~

  • @carlacatherineguzmangalarz1386
    @carlacatherineguzmangalarz13864 жыл бұрын

    Podrías agregarle subtítulos en español? :'(

  • @ruguoserliegise2716

    @ruguoserliegise2716

    3 жыл бұрын

    No can do

  • @zainabsohail2781
    @zainabsohail27812 жыл бұрын

    Please translate it in english for me... I want to know the dialysis process right after precipitation but unable to understand the chemicals

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    2 жыл бұрын

    Thanks for watching our channel. We already upload English version of this video. Please find the link. I wish you have a great research result in every moment.

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    2 жыл бұрын

    kzread.info/dash/bejne/g6qCspWberPgorg.html

  • @zainabsohail2781

    @zainabsohail2781

    2 жыл бұрын

    Thank you so much.

  • @zainabsohail2781

    @zainabsohail2781

    2 жыл бұрын

    Can you plz guide me in one more thing? I have to use distilled water as a dialysate buffer then in this case what will be the sample buffer? Will there be some issue in using Tris HCl as a sample buffer against Distilled water or should use some other? Plz suggest me the better optn... Thnx

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    2 жыл бұрын

    @@zainabsohail2781 Under normal conditions, if the dialysis buffer and the sample buffer are different, there is no problem with the dialysis itself. However, if the sample to be dialyzed is a protein, care must be taken as the structure of the protein may be denatured when distilled water meets the protein sample.

  • @supachaichumchuen4799
    @supachaichumchuen4799 Жыл бұрын

    English language please

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    Жыл бұрын

    kzread.info/dash/bejne/g6qCspWberPgorg.html Thank you for watching. We have already created and uploaded an English version of this video. Please check the address above. We wish you always good results.

  • @hafsasiddiqui8552
    @hafsasiddiqui85522 жыл бұрын

    Any one can translate it into English

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    2 жыл бұрын

    Thank you for visiting our channel. I will make the video subtitles in English later and upload it as a new video. Thank you.

  • @TariqMehmood-mc9tc
    @TariqMehmood-mc9tc6 ай бұрын

    Hello, first of all pls you define in english languge . then we batter under stand this method

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    6 ай бұрын

    An English version of the video has already been uploaded due to many people requesting it. I would appreciate it if you could check the link below. I wish you good success in all your research. kzread.info/dash/bejne/g6qCspWberPgorg.htmlfeature=shared

  • @Donee1919
    @Donee19193 ай бұрын

    Thankyou so much, really help me but I wish there is have english subtitle sis 🥹

  • @CDRTtube

    @CDRTtube

    3 ай бұрын

    kzread.info/dash/bejne/g6qCspWberPgorg.htmlfeature=shared Thank you for watching. Here is the same video with English subtitles. I would appreciate it if you could check the link. I hope you always achieve good research results.

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